尿素氮（BUN）試劑盒說明書

微量法

注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義

尿素是生物體內(nèi)含氮化合物分解的終產(chǎn)物，在尿酶催化下分解轉(zhuǎn)化成氨。血液尿素氮是腎功能的主要指標(biāo)之一。

測(cè)定原理

在堿性條件下，尿酶水解尿素產(chǎn)生氨，氨與次氯酸反應(yīng)生成氯胺，再與酚衍生物作用生成綠色吲哚酚，在 630nm 處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、研缽、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

試劑組成和配制

標(biāo)準(zhǔn)品：液體 1mL×1 支，4℃保存。

試劑一：粉劑×1 瓶，4℃避光保存，臨用前加 4mL 蒸餾水充分溶解。

試劑二：液體 8mL×1 瓶，4℃避光保存。

試劑三：液體 8mL×1 瓶，4℃避光保存。

樣品處理

1. 組織：按照質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL蒸餾水）加入蒸餾水，勻漿后于25℃，10000g 離心10min，取上清待測(cè)。

2. 細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：蒸餾水體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL蒸餾水），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）； 然后 4℃，10000g離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。

3. 血清或其它液體：直接檢測(cè)。

測(cè)定操作

注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次